【48812】根据双切向流的微流控别离设备完成外泌体的高效别离与富集

  外泌体（exosomes，EXOs）是一种直径在40 nm-200 nm之间的具有磷脂双分子层结构的囊泡。现在，科研人员现已从各种体液，如、血液、尿液、唾液、母乳、羊水、腹水、脑脊液以及胆汁中别离出了具有外泌体特征的囊泡。一起，外泌体作为一种功能性的囊泡，包含了丰厚的来自母体细胞的分子，例如DNA、RNA、脂质、代谢物、细胞质以及蛋白等，引起了科研人员的广泛爱好。但是，外泌体作为一种纳米尺度的柔性颗粒，且所在体液环境组成杂乱，因而，完成外泌体精确无损的无

  切向流过滤（TFF）技能是过滤技能的一种，当别离液体移动方向与过滤方向笔直，一部分液体将会透过别离介质，截流的颗粒在别离界面上不断被新弥补的液体打扫，降低了节省颗粒在膜外表的堆集，使其长时刻处在高效的过滤形式，因而，TFF在生物分子别离上有着共同的优势。外泌体等柔性囊泡在运用TFF办法来进行别离时因为不直接遭到流体的揉捏，而是经过轻柔的切向效果流过别离界面，极大地减小了对外泌体等柔性结构的损坏，确保了其完整性。一起，前期报导的单层TFF别离效果有限，往往有必要进行高速离心等预处理过程。因而，有必要开展一种双层TFF过滤设备用于外泌体的高效别离与富集。

  近来，东南大学刘松琴教授团队在世界期刊Analytica ChimicActa上宣布了题为“A double tangential flow filtration-based microfluidic device forhighly efficient separation and enrichment of exosomes”的研讨论文。该研讨规划了一种根据双切向流（DTFF）的微流控别离设备，结合双切向技能与两种孔径的纳米多孔膜，完成对30 nm-200 nm区间外泌体的高效别离与富集。使用该芯片别离肝疾病患者血清中的外泌体，并进行蛋白组学剖析，得出了外泌体表达的差异蛋白，为肝脏相关疾病的确诊供给了新思路。文章通讯作者为东南大学刘松琴教授，榜首作者为东南大学华鑫博士与研讨生朱倩。

  该论文首要搭建了一种根据双切向流的微流控设备，双层的TFF结构为尺度散布不行均匀的生物囊泡别离供给了牢靠的办法，经过构建两种不一样的尺度的别离界面，能够限制待别离生物囊泡的上下限，将大于该区间的物质阻拦，小于该区间的物质经过流体活动别离；一起，双层TFF效果相较于单层TFF，其压力更小，关于保持囊泡的完整性上更具优势。

  将该办法与传统外泌体别离办法-超速离心法作比照，芯片别离在耗时、纯度、回收率、耗材消耗以及设备消耗上均优于超速离心法。进一步用芯片与超速离心两种办法别离肝疾病患者血清中的外泌体，并进行蛋白组学剖析，芯片别离出的血清外泌体纯度高于超速离心法得到的外泌体，并在蛋白组学剖析中展示了更多的差异蛋白，为疾病相关外泌体的研讨及临床使用供给了新的办法。

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