检验科生化发光流水线的一些『不常见』问题分析

  生化分析仪和发光免疫分析仪是我们日常检验工作中最常使用的检验仪器之一，大多数检验测试的项目，如各种激素、蛋白、肿瘤标志物、维生素、人体所需的一些微量元素等都可以由它进行仔细的检测，大多数时候它是我们日夜相伴的可靠“战友”，让我们为临床提供准确的检测结果，及时反应患者的生理病理状况，为临床提供支持。但是也有一些特殊情况下，它无法准确提供检验测试结果，下面我们共同来看看几个日常工作中不常出现的问题。

  我科使用的免疫发光检测设备近期在工作中仪器出现了“稀释位堵针”这一报警。

  这个报警在日常工作中比较少见。分析堵针可能的原因：其一是针单元本身故障，管路堵塞，压力不足，但此时机器并未提示压力或真空泵发生故障。其二是来自患者标本中的凝块或者纤维物质吸入针单元，但是如果血清中存在凝块或纤维，早在针单元进行吸样时就会报警：“血清凝块或者样本不足”，而已经到了稀释杯的血清又怎么会堵针呢？

  观察此样本的血清部分，未曾发现凝块和胶冻状物质，但该样本同时上机检测的维生素B12和铁蛋白都正常得出结果，唯独叶酸一项报警异常没办法完成检测，对当前样本和该患者的其他样本都进行复测，仍出现相同报警信息，没办法完成检测。

  待仪器停机后，检查下位机单元的电压和压力情况，未发现异常，针单元的出水情况良好，确定了并非样本堵针或针单元本身损坏造成无法检测的情况。

  那么问题就出在叶酸这一个项目身上了，我们观察该患者其他项目结果，总蛋白和球蛋白异常升高。据文献所知，过量的球蛋白在碱性物质环境中以及检验测试仪器的孵育过程中会形成胶冻状物质，造成堵针情况。于是查看叶酸试剂的说明书发现，反应过程在第二步，将样本处理液2加入血清样本以释放内源性蛋白时，会加入氢氧化钠，氢氧化钠这种强碱和过量的球蛋白发生反应，在仪器的孵育下，蛋白质变性形成了沉淀胶冻状物质导致堵针。

  随后对该样本血清进行2倍稀释，实验成功完成。得到结果后，征求了试剂方工程师的意见，同时结合临床医生的意见，最终将结果报送。

  本案例中，患者的血清存在大量的球蛋白，而球蛋白在特定条件下即可形成沉淀物，造成稀释位置堵针。这种现象在多发性骨髓瘤，淋巴瘤，原发性巨球蛋白血症等条件下出现。患者血清中存在高浓度的免疫球蛋白，强碱与蛋白质反应，产生沉淀物。

  出现这个报警时，检查机器的针单元情况，排除因机械故障造成的异常结果后，可结合试剂特性，可以对样本血清进行2倍稀释，得到结果后计算患者当前的真实叶酸值。

  我科使用的生化分析仪在一次常规的更换光源灯之后，我们像往常一样进行了孵育，而后进行光度计和反应杯检测，检测结果正常。但是在之后的实验中发现，总胆红素和直接胆红素，白蛋白的结果异常，其他结果变化不大。胆红素的异常表现为，直接胆红素结果异常升高，导致计算的间接胆红素成为负值。白蛋白则是，部分结果偏低至20mmol/L以下，结果无法正常报出。而此时机器并未报警，也没再次出现“反应吸光度超限”这一异常提示。

  随即考虑光源异常，再次更换光源灯后，现象未改善。立刻对试剂重新校准定标，但该现象任旧存在，而且经过几次校准后发现，校准曲线也受一定的影响，K值波动极大。随后考虑试剂交叉污染，更换试剂位置，更换试剂，均无改善，检查吸样针单元，注射器并未漏液，针的吸样压力和出水均正常。

  对生化检验测试的项目进行重复性检测，仅有这三项重复性异常，而且反应曲线出现了“跳点”，说明反应过程出现了问题。这种情况常见于光源的灯不稳定，光源采集位置存在偏差，但是对光源灯和光路一再检测，均未曾发现问题。

  随后配合工程师检查反应体系，发现其中一个搅拌杆并未触底，复盘后发现，更换光源灯时调整了光源强度，这样的一个过程中需要对特定反应杯加去离子水，过程中反应盘盖触及搅拌杆，而搅拌杆的弹簧老化，并未将其完全复位，造成反应体系并未完全反应。而上述三项，反应度较低，极易受到反应体系的影响。出现了异常结果。复位后重新定标，进行多次质控，确保重复性和准确性回到正常状态，仪器重新投入使用。

  这个案例中，我们更换光源灯后就出现了异常结果，很容易联想到，光源和光路发生故障。个别几个试剂出问题，我们很容易想到，试剂产生交叉污染，而非关注全局的反应过程。但是换一个思路，从反应体系的方面出发，个别项目，个别样本反应不完全，联想到试剂加样，和具体的反应过程，从头检查，加样，加试剂，搅拌混匀的反应机构，问题就迎刃而解了。

  当生化检测仪出现总胆红素和直接胆红素结果异常倒置，白蛋白异常降低的检测结果时，在对光路和试剂的检查之后仍未察觉缺陷，可以仔细检查搅拌棒，磁分离针等单元，及时排除反应体系故障，让机器恢复正常运行，得到正确的结果。

  检验工作并不仅仅是把血样放进机器，让机器读出结果就结束的简单工作。结果的出现，才是我们检验人真正的开始。我们的结果报送关乎临床的判断，同样联系着患者的生命。每一份结果都要求我们检验人用心审视，用知识判断。当我们遇到异常结果时，平时的点点滴滴，用心维护我们的“战友”做好质控分析，给予仪器和我们自己足够的信心，同时发散自己的思维，从患者，标本，仪器反应体系本身找问题，最终解决异常，为临床提供更多更准确的支持。

  生化分析仪和化学发光分析仪作为实验室的重要设备之一，其稳定性和准确性对于实验室的工作效率和质量至关重要。通过了解常见故障类型、缘由分析及解决方案，实验室工作人能更好地管理并维护仪器设施，确保其正常运行，来提升实验室的工作效率和质量。此外，建议实验室制定定期维护和校准计划，以预防潜在的故障和问题，确保生化分析仪和化学发光仪始终处在良好的工作状态。同时，实验室工作人员应不断学习新的知识和技能，以适应持续不断的发展的技术和设备，提高个人的专业能力和水平。

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